La chromatographie est un procédé de séparation de substances. Il est mis en oeuvre en utilisant un tube étroit (colonne) garnie avec un matériau spécifique. Un mélange de composés est forcé à travers la colonne en utilisant une pression. Chaque composé sort de la colonne au cours de certaines périodes, ce qui représente graphiquement un pic sur un chromatogramme. La position du maximum du pic, appelé temps de rétention, est spécifique de chaque composé. Performance des colonnes chromatographiques est exprimée comme un nombre de plateaux théoriques. Un plateau théorique est une couche imaginaire dans une colonne qui permet d'interpréter le processus de séparation. Un nombre plus élevé de plateaux théoriques correspond à une meilleure efficacité de la colonne.
Obtenir une carte de chromatogramme de votre colonne chromatographique.
Tracez une ligne verticale à partir du maximum du pic de la ligne de base.
Mesurer la longueur de cette ligne et le diviser par 2 pour trouver le centre de la ligne. Dans ces étapes, effectuer toutes les mesures en millimètres (mm).
Tracez une ligne passant par le centre et parallèle de la ligne à la ligne de base.
Mesurer la longueur de la ligne de l'étape 4 pour obtenir la largeur de pic à mi-hauteur. Par exemple, la largeur du pic est de 12 mm.
Mesurer la distance entre 0 et le maximum du pic pour obtenir le temps de rétention. Par exemple, le temps de rétention est de 650 mm. A noter que le temps de rétention est normalement exprimé en minutes, mais il a également proportionnelle à la longueur mesurée.
Divisez le temps de rétention par la largeur du pic et augmenter le quotient de la puissance de 2. Puis, multiplier le résultat par 5,55 pour calculer le nombre de plateaux théoriques:
Nombre de plateaux théoriques = 5.55 * (temps de rétention / largeur Peak) ^ 2
Dans notre exemple, il serait 5,55 * (650 mm / 12 mm) ^ 2 = 16 284 plateaux théoriques. Le résultat est arrondi au nombre entier.