Escherichia coli, E. coli, est une bactérie qui se développe dans les intestins des mammifères. Cette bactérie a été découverte à la fin des années 1800. Depuis lors, il a eu une longue histoire d'utilisation dans la recherche scientifique. Il est l'organisme le plus largement utilisé en génétique moléculaire. Une partie de la raison pour E. coli est couramment utilisée dans la recherche scientifique est qu'il est facile à cultiver dans un laboratoire. Les facteurs qui rendent E. coli sont faciles à cultiver ses besoins nutritionnels simples, taux de croissance rapide et ses besoins d'entretien modérés.
Stériliser la boucle inoculation en le plaçant dans la flamme du brûleur Bunsen. Passez la moitié inférieure de la boucle à travers la flamme jusqu'à ce qu'il rougeoie.
Laisser refroidir la boucle. Vous pouvez toucher à l'agar stérile sur la plaque pour vous assurer qu'il n'a pas refroidi. Ne placez pas la boucle sur la table ou le laisser contacter autre que agar stérile ou la culture souhaitée, maintenant qu'il a été stérilisé rien.
Trempez la boucle dans la culture de E. coli, puis l'enlever.
Ouvrez la plaque de gélose et glisser doucement la boucle avant et en arrière à travers la surface d'une partie de l'agar-agar. Prenez soin de ne pas égratigner par l'agar avec la boucle. L'agar fournit les nutriments les E. coli ont besoin pour croître.
Placer la boucle dans la flamme du bec Bunsen à nouveau pour le stériliser. Une fois que la tige de la boucle se refroidit, toucher à une partie stérile de la plaque pour vous assurer qu'il est cool, puis glisser la boucle à travers votre première série pour faire une deuxième série. Cette deuxième série est une version diluée de la première série. Répétez ce processus de stérilisation et glisse jusqu'à plusieurs sections de la plaque de gélose ont été glissé sur. La raison pour laquelle vous faites cela est si vous pouvez ensuite choisir de simples colonies clonales. Cela vous aidera à vous assurer que vous avez au moins une section qui a colonies-- personne pas trop concentré (qui aura une croissance trop forte, et ne vous permettra pas de choisir à partir d'une seule colonie) et pas trop diluer (qui donnerait pas de colonies) .
Stériliser la boucle dans la flamme une dernière fois avant de le mettre de côté dans la zone de travail.
Mettre le couvercle sur la plaque de gélose. Tourner la plaque à l'envers et placez-le dans l'incubateur réglé à 37 degrés Celsius (98,6 degrés Fahrenheit). Cette température incubation idéal simule la température du corps humain où E. coli réside. Dans les 24 à 48 heures, des colonies visibles de la bactérie E. coli apparaissent dans la plaque de gélose.